PCR-tekniikalla voidaan haluttu (lyhyt) DNA-kaksoisjuoste kloonata in vitro. Synteesi on sykli, jossa on kolme vaihetta. Syklejä toistamalla saadaan lyhyessä ajassa suuri määrä identtisiä DNA-kaksoisjuosteita. Yhden syklin kesto on noin 5 min.
Samuli Turunen
Kemian ja biologian sisällöt Opetus.tv:ssä.
5 vastausta artikkeliin “PCR”
Jätä vastaus
Elikkä pcr:ssä aluke on siis dna:sta rakennettu toisin kuin replikaatiossa jolloin se on rna:ta?
Kyllä, olet oikeassa.
Mitenkäs halutun DNA pätkän kopionnin rajaus onnistuu?
Ensimmäisessä kopioinnissa sen jälkeen, kun DNA on denaturoitu ja DNA polymeraasi alkaa tekemään vastinjuosteita niin se tekee niitä niin kauan kunnes: 1) Polymeraasi irtoaa luonnostaan, mitä tapahtuu usein syntetisoitaessa pitkiä DNA pätkiä tai 2) PCR -laitteen 3 lämpötilasyklit ovat ajastettu eli kun lämpötila taas nousee yli 90 asteeseen DNA polymeraasi irtoaa.
Tämän ensimmäisen kopioinnin jälkeen alukkeet irtoavat ja saadaan haluttu pituus automaattisesti rajaamalla uudestaan alue alukkeilla.
Oheinen video selventää hyvin asiaa:
https://www.youtube.com/watch?v=JmveVAYKylk
DNA polymeraasi on myös replikaatiossa ja hoitaa johtavan juosten synteesiä – RNA polymeraasi laahaavan juosten osalta. Näin in vivo.